一文讀懂E2定量elisa 試劑盒的原理與操作流程
點(diǎn)擊次數(shù):20 更新時(shí)間:2025-06-19
E2定量elisa 試劑盒在雌激素水平檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,無論是臨床診斷還是科研實(shí)驗(yàn),都離不開它的精準(zhǔn)助力。想要用好這款試劑盒,了解其原理與操作流程是關(guān)鍵。?
E2定量elisa 試劑盒基于抗原-抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)原理。E2(雌二醇)作為抗原,與特異性抗體能發(fā)生高度專一的結(jié)合反應(yīng)。在試劑盒中,預(yù)先將針對(duì)E2的特異性抗體包被在微孔板上,加入待檢樣本后,樣本中的E2會(huì)與包被抗體結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)記的E2抗原,它也會(huì)與包被抗體結(jié)合,形成競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系。經(jīng)過洗滌步驟,未結(jié)合的物質(zhì)被去除,而結(jié)合在微孔板上的酶標(biāo)抗原-抗體復(fù)合物得以保留。然后加入酶的底物,酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顏色深淺與樣本中E2的含量呈反比,通過酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度,即可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣本中E2的濃度。?
在操作流程上,首先要做好準(zhǔn)備工作,確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境潔凈,將試劑盒和樣本恢復(fù)至室溫。接著進(jìn)行加樣,準(zhǔn)確吸取樣本和標(biāo)準(zhǔn)品加入微孔板,同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照、陰性對(duì)照和陽性對(duì)照。加樣完成后,輕輕振蕩微孔板使反應(yīng)充分,在適宜溫度下孵育一定時(shí)間。隨后進(jìn)行洗滌,這一步驟需嚴(yán)格按照說明書操作,以去除未結(jié)合物質(zhì),避免影響檢測(cè)結(jié)果。洗滌后加入酶結(jié)合物,再次孵育,之后加入底物顯色,顯色時(shí)間需精確把控。較后加入終止液終止反應(yīng),迅速用酶標(biāo)儀在規(guī)定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度,分析數(shù)據(jù)得出檢測(cè)結(jié)果。?
掌握E2定量elisa 試劑盒的原理與操作流程,能幫助我們更科學(xué)、準(zhǔn)確地完成檢測(cè)工作,為相關(guān)研究和診斷提供可靠的數(shù)據(jù)支持。?